技術(shù)文章
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一文帶你全面了解細(xì)胞因子一、細(xì)胞因子的概念細(xì)胞因子(cytokine,CK),是由免疫細(xì)胞(如單核、巨噬細(xì)胞、T細(xì)胞、B細(xì)胞、NK細(xì)胞等)和某些非免疫細(xì)胞(內(nèi)皮細(xì)胞、表皮細(xì)胞、纖維母細(xì)胞等)經(jīng)刺激而合成、分泌的一類具有廣泛生物學(xué)活性的小分子蛋白質(zhì)(多肽或糖蛋白)。細(xì)胞因子的發(fā)現(xiàn)歷史1957年,發(fā)現(xiàn)干擾素(interferon,IFN)1969年,提出淋巴因子(lymphokine)的概念1974年,定名細(xì)胞因子(cytokine,CK)1975年,命名了腫瘤壞死因子(Tumo...
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RNApulldown實(shí)驗(yàn)技術(shù)1.實(shí)驗(yàn)原理RNApulldown是體外研究RNA與蛋白互作的重要技術(shù)。該技術(shù)是用生物素標(biāo)記體外轉(zhuǎn)錄的靶RNA分子,再用鏈霉親和素純化出與靶RNA結(jié)合的蛋白復(fù)合體,洗脫得到RNA結(jié)合蛋白質(zhì)。再通過(guò)westernblot實(shí)驗(yàn)檢測(cè)特定的RNA結(jié)合蛋白是否與靶RNA結(jié)合;或通過(guò)質(zhì)譜儀檢測(cè)可以篩選出與靶RNA結(jié)合的蛋白。生物素與鏈霉親和素間的作用是目前已知強(qiáng)度最高的非共價(jià)作用;其中活化生物素可以在蛋白質(zhì)交聯(lián)劑的介導(dǎo)下,與已知的幾乎所有生物大分子偶聯(lián)。因此...
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DNApulldown實(shí)驗(yàn)技術(shù)1.實(shí)驗(yàn)原理DNApulldown是體外研究DNA與蛋白互作的有力工具。該技術(shù)將生物素標(biāo)記的DNA片段結(jié)合在鏈霉親和素磁珠上,再與細(xì)胞核蛋白孵育,純化出與DNA片段互作的蛋白,洗滌洗脫得到的蛋白產(chǎn)物,做Westernblot檢測(cè)特定蛋白是否與靶DNA片段結(jié)合;做質(zhì)譜鑒定即可篩選出與DNA片段可能互作的蛋白信息(如:轉(zhuǎn)錄因子、組蛋白等)。生物素與鏈霉親和素間的作用是目前已知強(qiáng)度最高的非共價(jià)作用;其中活化生物素可以在蛋白質(zhì)交聯(lián)劑的介導(dǎo)下,與已知的幾乎...
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GSTPulldown實(shí)驗(yàn)技術(shù)1.實(shí)驗(yàn)原理Pulldown技術(shù)是將"誘餌"蛋白與一種易于純化的配體標(biāo)簽(如:GST標(biāo)簽、His標(biāo)簽)進(jìn)行融合表達(dá),而帶標(biāo)簽的誘餌蛋白能被特異結(jié)合該標(biāo)簽的固相親和配基捕獲,形成"次級(jí)親和支持物",用于純化與誘餌蛋白相互作用的其他蛋白。純化產(chǎn)物洗脫后,經(jīng)Westernblot驗(yàn)證或LC-MS/MS,即鑒定與誘餌蛋白互作的蛋白。1988年Smith等利用谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶(GST)融合標(biāo)簽從細(xì)菌中一步純化出GST融合蛋白。從此,GST融合蛋白在蛋白...
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細(xì)胞凋亡人體內(nèi)的細(xì)胞注定是要死亡的,有些死亡是生理性的,有些死亡則是病理性的,有關(guān)細(xì)胞死亡過(guò)程的研究,已成為生物學(xué)、醫(yī)學(xué)研究的一個(gè)熱點(diǎn)。已知的細(xì)胞死亡方式起碼有兩種,即細(xì)胞壞死與細(xì)胞凋亡(apoptosis)。細(xì)胞壞死是早已被認(rèn)識(shí)到的一種細(xì)胞死亡方式,而細(xì)胞凋亡則是逐漸被認(rèn)識(shí)的一種細(xì)胞死亡方式。此圖片來(lái)源于網(wǎng)絡(luò)細(xì)胞凋亡是細(xì)胞的一種基本生物學(xué)現(xiàn)象,在多細(xì)胞生物去除不需要的或異常的細(xì)胞中起著必要的作用。它在生物體的進(jìn)化、內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定以及多個(gè)系統(tǒng)的發(fā)育中起著重要的作用。細(xì)胞凋亡不僅...
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中樞性性早熟(CPP)是兒科內(nèi)分泌的常見(jiàn)疾病,發(fā)病率較高,且逐年增加趨勢(shì)明顯。CPP可以導(dǎo)致患者或者家長(zhǎng)出現(xiàn)社會(huì)、心理問(wèn)題,而且還可能嚴(yán)重?fù)p害兒童的終身高。因此,CPP是兒科內(nèi)分泌醫(yī)生密切關(guān)注的疾病之一。CPP發(fā)病原因目前尚不明確,可能是由于某種因素促發(fā)了下丘腦促性腺激素釋放激素(GnRH)神經(jīng)元,使其提前活化,通過(guò)分泌大量的GnRH,進(jìn)而激活下丘腦-垂體-性腺軸。5-羥色胺(5-HT)最初在血清中發(fā)現(xiàn),又名血清素,是一種吲哚衍生物,它廣泛存在于哺乳動(dòng)物中。5-HT由色氨酸代...
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細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)及其定制化解決方案常用的細(xì)胞生物學(xué)相關(guān)實(shí)驗(yàn),主要包含:細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞保種、原代細(xì)胞分離和培養(yǎng)、細(xì)胞增殖檢測(cè)(MTT法/CCK8法)、細(xì)胞凋亡、細(xì)胞周期、細(xì)胞遷移、細(xì)胞侵襲、流式細(xì)胞分選、慢病毒包裝及穩(wěn)轉(zhuǎn)株篩選、電生理檢測(cè)、定制化細(xì)胞模型等。原代細(xì)胞分離我司可提供細(xì)胞培養(yǎng)和原代細(xì)胞分離的服務(wù)。例如:原代schwann細(xì)胞、原代海馬神經(jīng)元細(xì)胞、原代成骨細(xì)胞、臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞、海綿體平滑肌細(xì)胞等。細(xì)胞培養(yǎng)與傳代細(xì)胞凍存/保種細(xì)胞復(fù)蘇細(xì)胞換液培養(yǎng)細(xì)胞傳代培養(yǎng)細(xì)胞共培養(yǎng)細(xì)...
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人的生存離不開(kāi)氧氣。如果你感覺(jué)很長(zhǎng)一段時(shí)間里整天無(wú)精打采、昏昏欲睡,在排除睡眠不足的因素外,那么你有可能是血液中缺氧了。血液除了能在身體內(nèi)流動(dòng),攜帶能量、廢物等,最主要的功能就是攜帶氧氣,這是它的基本功能之一。如果血液缺氧,嚴(yán)重時(shí)就會(huì)導(dǎo)致器官病變,最常見(jiàn)的就是心梗、腦梗等。近年來(lái),低氧(Hypoxic)于生物機(jī)體及細(xì)胞的生理作用及其分子機(jī)制研究越來(lái)越受到醫(yī)學(xué)科研學(xué)者的關(guān)注。低氧培養(yǎng)的適用研究領(lǐng)域近30年來(lái)與“低氧誘導(dǎo)”相關(guān)的文章統(tǒng)計(jì)(此項(xiàng)數(shù)據(jù)來(lái)源于Pubmed數(shù)據(jù)庫(kù))細(xì)胞是生...
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